Tách dòng, thiết kế vector và chuyển gen GmEXP1 vào cây thuốc lá Nicotinana tabacum
Main Article Content
Abstract
Tóm tắt: Expansin có vai trò quan trọng trong pha giãn thành tế bào ở miền sinh trưởng của hệ rễ cây đậu tương. Hai vùng chức năng (DPBB và Pollen allerg) xác định cho protein expansin có khả năng tác động phá vỡ liên kết phi hoá trị giữa polysaccharide với vi sợi cellulose giúp thành tế bào dễ dàng giãn nở (cả chiều ngang và chiều dọc) dưới tác động của sức trương nước. Hoạt động của gen GmEXP1 (xác định protein expansin) liên quan đến sự kéo dài rễ cây đậu tương, làm tăng cường khả năng chịu hạn của cây đậu tương. Trong bài báo này, chúng tôi trình bày kết quả của việc thiết kế vector mang cấu trúc gen GmEXP1 được lai với một đoạn mã hoá peptide c-myc và KDEL, dưới sự điều khiển của CaMV35S promoter; chuyển cấu trúc trên vào cây thuốc lá mô hình (Nicotinana tabacum) nhờ A.tumefaciens. Phân tích sự có mặt của gen trong 44 dòng cây thuốc lá tái sinh lựa chọn ngẫu nhiên bằng PCR cho thấy 32/44 dòng thuốc lá được chuyển có mang gen GmEXP1, như vậy cấu trúc này có thể được sử dụng để chuyển gen vào các cây trồng quan tâm.
Từ khoá: Expansin, Glycine max, GmEXP1, kéo dài rễ, giãn thành tế bào.
References
[2] Le DT, Nishiyama R, Watanabe Y, Mochida K, Yamaguchi-Shinozaki K, Shinozaki K, and Tran LS (2011). Genom-Wide Expression Proling of Soybean Root and Shoot Tissues under Dehydration Stress. DNA Research 18: 17 - 29.
[3] Kaspar TC, Taylor HM and Shibles RM (1984). Taproot elongation rates of Soybean cultivars in the glasshouse and their relation to field rooting depth. Crop Sci 24: 916 - 920.
[4] Brummall DA, Harpester MH, Civello PM, Palys JM, Bennett AB, and Dunsmuir P (1999). Modification of Expansin Protein Abundance in Tomato Fruit Alters Softening and Cell Wall Polymer Metabolism during Ripening. Plant Cell 11: 2203 - 2216.
[5] Cosgrove DJ (2000). Loosening of plant cell walls by expansins. Nature 407: 321 - 326.
[6] Lucca P, Ye X, Potrykus I (2001). Effective selection and regeneration of transgenic rice plants with mannose as selective agent. Mol Breed 7: 43- 49.
[7] Li Y, Catherine P. Darley, Veronica Ongaro, Andrew Fleming, Ori Schipper, Sandra L. Baldauf, and Simon J. McQueen-Mason (2002). Plant expansins are a complex multigene family with an ancient evolutionary origine. Plant Physiol 128: 854 - 864.
[8] Lee DK, Ahn JH, Song SK, Choi YD, Lee JS (2003). Expression of an Expansin gene is correlated with root elongation in soybean. Plant Physiol 131: 985 - 977.
[9] Sambrook J, Russell DW (2001). Molecular Cloning A Laboratory Manual, 3rd ed. Cold Spring Harbor Laboratory, Cold Spring Harbor, NY.