Nhân dòng Promoter và Terminator Heat Shock Protein 18.2 từ Arabidopsis Thaliana làm nguyên liệu thiết kế vector biểu hiện gen ở thực vật
Main Article Content
Abstract
Promoter HSP 18.2 và terminator HSP 18.2 tham gia điều hòa hoạt động của protein sốc nhiệt HSP 18.2, hoạt động của promoter được cảm ứng bởi nhiệt độ. Nghiên cứu này trình bày các kết quả nhân dòng promoter và terminator HSP 18.2 từ Arabidopsis thaliana. Promoter HSP 18.2 phân lập được có chiều dài 720 bp và mang đầy đủ các yếu tố điều hòa cis của promoter điển hình: hộp CAAT (vị trí 39-42), 2 hộp GATA (vị trí 73-76 và 406-409) và hộp TATA (vị trí 643-649). Ngoài ra, promoter HSP 18.2 thu được còn có sáu vùng cảm ứng với nhiệt độ: vị trí 482-495, 492-505, 502-515, 549-562, 559-572 và 600-613. Terminator HSP 18.2 có chiều dài 250 bp, vị trí đuôi poly A là ở nucleotide 158. Hai trình tự này đã được đăng ký trên ngân hàng Gen với mã số lần lượt KM083119 và KP008108. Các trình tự này nguyên liệu rất tốt cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm thiết kế vector biểu hiện hiệu quả protein tái tổ hợp ở thực vật. Terminator HSP 18.2 có chiều dài 250 bp mang poly A ở vị trí nucleotide 158. Hai trình tự này đã được đăng ký trên ngân hàng Gen với mã số lần lượt KM083119 và KP008108. Các trình tự này nguyên liệu rất tốt cho các nghiên cứu tiếp theo nhằm thiết kế vector biểu hiện hiệu quả protein tái tổ hợp ở thực vật.
Từ khóa: Arabidopsis, biểu hiện, promoter, tái tổ hợp, terminator.
References
[2] Desai PN, Shrivastava N, Padh H (2010). Production of heterologous proteins in plants: Strategies for optimal expression. Biotechnol Adv 28:427-435.
[3] Streatfield SJ (2007). Approaches to achieve high-level heterologous protein production in plants. Plant Biotechnol J 5(1):2-15.
[4] Lê Thị Thu Hiền, Trần Thị Phương Liên, Nông Văn Hải (2007. Tổng quan về promoter và ứng dụng trong công nghệ gen thực vật. Tạp chí Công nghệ Sinh học 5(1): 1-18.
[5] Lee KT, Chen SC, Chiang BL, Yamakawa T (2007). Heat-inducible production of β-glucuronidase in tobacco hairy root cultures. Appl Microbiol Biotechnol 73:1047-1053. DOI10.1007/s00253-006-0576-2
[6] Moriwaki M, Yamakawa T, Vashino T, Kodama T, Igarashi Y (1999b). Organ-specific expression of β-glucuronidase activity driven by the Arabidopsis heat shock promoter in heat-stressed transgenic Nicotiana plumbaginitblia. Plant Cell Rep 19:92-95.
[7] Moriwaki M, Yamakawa T, Washino T, Kodama T, learashi Y (1999a). Delayed recovery of β-glucuronidase activity driven by an Arabidopsis heat shock promoter in heat-stressed transgenic Nicotiana plumbaginitblia. Plant Cell Rep 19:96-100.
[8] Carswell S, Alwine JC (1989). Efficiency of utilization of the simian virus 40 late polyadenylation site: effects of upstream sequences. Mol. Cell Biol 9: 4248-4258.
[9] Ingelbrecht IL, Herman LM, Dekeyser RA, Van Montagu MC, Depicker AG (1989). Different 3 ′ end regions strongly influence the level of gene expression in plant cells. Plant Cell 1:671-680.
[10] Hirai T, Kurokawa N, Duhita N, Hiwasa-Tanase K, Kato K, Ezura H (2011). The HSP terminator of Arabidopsis thaliana induces a high level of miraculin accumulation in transgenic tomatoes. J Agric Food Chem 59:9942-9949. doi:10.1021/jf202501e
[11] Hall TA (1999). BioEdit: a user-friendly biological sequence alignment editor and analysis program for Windows 95/98/NT. Nucl. Acids. Symp 41:95-98.
[12] Nagaya S, Kawamura K, Shinmyo A, Kato K (2010). The HSP terminator of Arabidopsis thaliana increases gene expression in plant cells. Plant Cell Physiol 51:328-532. doi:10.1093/pcp/pcp188
[13] http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast
[14] http://www.dna.affrc.go.jp/PLACE