Thiết kế vector biểu hiện mang gen OsNAC1 được điều khiển bởi promoter cảm ứng điều kiện bất lợi RD29A
Main Article Content
Abstract
Tóm tắt: Gen OsNAC1 đã được nghiên cứu và chứng minh vai trò tăng cường khả năng kháng hạn của lúa. Việc sử dụng các promoter cảm ứng với điều kiện bất lợi của môi trường, trong đó có promoter RD29A, để điểu khiển biểu hiện của gen đáp ứng stress đã được rất nhiều nghiên cứu trước đây áp dụng thành công. Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã phân lập và nhân dòng promoter cảm ứng hạn RD29A từ hệ gen của cây Arabidopsis thaliana bằng phản ứng PCR và thiết kế vector biểu hiện mang gen mã hóa nhân tố phiên mã OsNAC1 dựa trên bộ khung của vector pCAMBIA1301. Trình tự mã hóa OsNAC1 được tách dòng từ vector nhân dòng pJET/OsNAC1 và lắp ghép vào hệ vector biểu hiện pCAM-Rd. Các vector tái tổ hợp pCAM-Rd/NAC1-S và pCAM-Rd/NAC1-AS sẽ được sử dụng cho nghiên cứu chuyển gen vào cây mô hình thông qua vi khuẩn Agrobacterium tumefaciens.
Từ khóa: Chịu hạn, lúa, OsNAC1, RD29A, chuyển gen.References
[2] Wu Y., Zhou H., Que Y. X., Chen R. K. and Zang M. Q., 2008. Cloning and identification of promoter PRD29A and its application in sugarcane drought resistance. Sugar Tech., 10(1): 36-41.
[3] Zang N., Si H. J. and Wang Q., 2005. Cloning of RD29A gene promoter from Arabidopsis thaliana and its application in stress-resistance transgenic potato. Acta. Agronomica Sinica, 31(2):159-164.
[4] Gao S. Q., Chen M. and Ma Y. Z., 2005. Activity of RD29A promoter in Wheat immature embryonic calli. Acta. Agronomica Sinica, 31(2):150-153.
[5] Huong N. T. T., Mau C. H., Son L. V., Cuong N. H., Ha C. H., 2010. Tách dòng và đánh giá hoạt động của promoter cảm ứng khô hạn RD29A từ Arabidopsis thaliana. Tạp chí Công nghệ Sinh học 8(4):1809-1814.
[6] Sun X. H. and Chen M. J., 2002. A brief account of promoter cloning. Acta. Edulis Fungi, 9(3):57-62.
[7] Ooka H., Satoh K., Nagata T., Otomo Y., Murakami K., Matsubara K., Osato N., Kawai J., Carninci P., Hayashizaki Y., Suzuki K., Kojima K., Takahara Y., Yamamoto K. and Kikuchi S., 2003. Comprehensive analysis of NAC family genes in Oryza sativa and Arabidopsis thaliana. DNA Res., 10:239-247.
[8] Rushton P. J., Bokowiec M. T., Han S., Zhang H., Brannock J. F. and Chen X., 2008. Tobacco transcription factors: novel insights into transcriptional regulation in the Solanaceae. Plant Physiol., 147:280–295.
[9] Hu R., Qi G., Kong Y., Kong D., Gao Q. and Zhou G., 2010. Comprehensive analysis of NAC domain transcription factor gene family in Populus trichocarpa. BMC Plant Biol., 10:145.
[10] Nuruzzaman M., Manimekalai R., Sharoni A. M., Satoh K., Kondoh H. and Ooka H., 2010. Genome-wide analysis of NAC transcription factor family in rice. Gene, 465:30-44.
[11] Hu H., Dai M., Yao J., Xiao B., Li X., Zhang Q. and Xiong L., 2006. Overexpressing a NAM, ATAF, and CUC (NAC) transcription factor enhances drought resistance and salt tolerance in rice. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103(35):12987-92.
[12] Liu G., Li X., Jin S., Liu X., Zhu L., Nie Y. and Zhang X., 2014. Overexpression of rice NAC gene SNAC1 improves drought and salt tolerance by enhancing root development and reducing transpiration rate in transgenic cotton. PLoS One, 9(1).
[13] You J., Zong W., Li X., Ning J., Hu H., Li X., Xiao J. and Xiong L., 2013. The SNAC1-targeted gene OsSRO1c modulates stomatal closure and oxidative stress tolerance by regulating hydrogen peroxide in rice. J. Exp. Bot., 64(2):569-83.
[14] Doyle J. J. and Doyle J. L., 1990. Isolation of plant DNA from fresh tissue. Focus, 12:13-15.
[15] Sanger F., S. Micklen, and AR Coulson, 1977. DNA sequencing and chain-terminating inhibitors. Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 74: 5463-5467.